注射用盐酸槐定碱对血管刺激性 溶血 过敏性试验研究

　　2.3  全身主动过敏实验实验开始前，动物预先饲养1周以观察其活动表现，动物室温度22～24℃，湿度40%～60%，取48只健康雄性豚鼠，随机分成 5％葡萄糖注射液组、阳性药物组（白蛋白组）、注射用盐酸槐定碱大剂量组、小剂量组，每组12只。分别给各组豚鼠隔日腹腔注射5％葡萄糖注射液、白蛋白25 mg/kg，注射用盐酸槐定碱4，16 mg/kg，体积为0.5 ml，共注射3次，然后每组内分成两批，于第1次给药后14 d及21 d分别静脉注射5％葡萄糖注射液、白蛋白50 mg/kg，注射用盐酸槐定碱16 ，64 mg/kg，体积为1 ml，观察豚鼠在静脉注射后30 min内有无表2中的兴奋不安、抓鼻、竖毛、呼吸困难、痉挛、休克甚至死亡等过敏反应症状。

　　表2  过敏反应症状（略）

　　2.4  被动皮肤过敏实验

　　2.4.1  大鼠含IgE的抗血清制备取4只健康雄性SD大鼠，按注射剂大鼠同种被动皮肤过敏试验的要求，分别腹腔注射5%葡萄糖注射液、牛血清白蛋白25 mg/kg，注射用盐酸槐定碱4，16 mg/kg，同时腹腔注射白百破三联疫苗1 ml/只，隔日1次、共3次。11 d后眼眶取血，分离血清，－20℃保存，备用。

　　2.4.2  大鼠同种被动皮肤过敏反应实验实验开始前，动物预先饲养1周以观察其活动表现，动物室温度22～24℃，湿度40%～60%，取18只健康雄性SD大鼠，随机分为5%葡萄糖组、阳性组（牛血清白蛋白组）、注射用盐酸槐定碱大剂量组和小剂量组。分别在各组大鼠背中线两侧距脊柱约1.5 cm处备皮，4 cm×4 cm。
   
　　取上述含IgE的抗血清，用5%葡萄糖注射液按1∶2，1∶4，1∶8，1∶16比例分别稀释成4个稀释度，将稀释的抗血清按逆时针方向（左上-左下-右下-右上）皮内注射于大鼠背部预先备皮部位，每一稀释度注射一个点，每点注射0.1 ml。致敏24 h后，各组静脉注射与致敏剂量相同的激发抗原加等量的0.8％伊文思兰染料共1 ml，进行激发。30 min后处死各组大鼠，测量皮肤内层的蓝色反应斑直径，直径大于5 mm者判定为阳性。不规则斑点的直径为长径与短径之和。

　　3  结果

  　　3.1  血管刺激性实验给药组3只家兔耳缘静脉注射部位均未见红肿、充血等刺激现象。光镜病理组织学检查：注射用槐定碱给药组和5％葡萄糖对照组家兔耳缘静脉注射部位血管结构完整，血管内皮细胞无肿胀、变性、坏死，管壁无炎细胞浸润，管腔内无血栓形成。

　　3.2  溶血性实验  在0.25～3 h及24 h内除第7管（阳性对照管）溶液呈现澄明红色，其余6管均末见澄明红色，且红细胞全部下沉，上层液体无色澄明，经振摇后红细胞能均匀分散。表明注射用盐酸槐定碱无溶血及无凝集作用。

　　3.3  全身主动过敏实验 5％葡萄糖注射液组、注射用盐酸槐定碱大、小剂量组在静脉给药30 min后，豚鼠活动正常，未出现1～20级反应症状，判定为过敏反应阴性。而阳性药组豚鼠出现痉挛、抽搐、休克死亡，判定为过敏反应极强阳性。

　　3.4  被动皮肤过敏实验注射用盐酸槐定碱大、小剂量组、5％葡萄糖注射液组大鼠背部皮肤均未见蓝色反应斑点。阳性组注射部位皮肤均不同程度的出现蓝色斑点反应， 其中1∶16处有3例出现蓝斑，1∶8处有4例出现蓝斑，1∶4与1∶2处6例均出现蓝斑，蓝斑直径均大于5 mm，判定为阳性反应。结果表明：注射用盐酸槐定碱无同种被动皮肤致敏作用。

　　4  讨论
   
　　本实验采用的方法简便、准确、可靠，4项指标检测注射用盐酸槐定碱均未出现阳性结果，说明注射用盐酸槐定碱对血管无刺激性，无溶血作用，全身主动过敏反应阴性，无同种被动皮肤致敏作用。表明注射用盐酸槐定碱安全性好，可供临床应用。

【参考文献】
  　［1］ 李雪梅，吴运光，潘达鑫，等.新型抗肿瘤药槐定碱［J］.中国新药杂志，2006，15（8）：654.

　　［2］ 陈正爱，王 丹，李美子.香丹注射液安全性实验报告［J］.时珍国医国药，2006，17（2）：185.