1)，(0.27±0.10)g，差异显著(P<0.01)。
2.4 Colon26细胞和Colon26/IL21肿瘤组织病理学观察
接种Colon26细胞小鼠爪垫肿瘤组织镜下可见组织间质少，细胞排列无规律，部分组织细胞出现坏死。细胞核体积增大，胞浆与细胞核比例较正常增大，核大小不一，形态不规则，多染色深，可见病理性核分裂像，呈恶性肿瘤生长。接种Colon26/IL21细胞小鼠的肿瘤组织可见肿瘤细胞核固缩、核溶解，胞浆空泡变性;肿瘤组织萎缩，间质纤维组织增生，出现部分正常皮下组织，如皮脂腺、毛囊等，是肿瘤萎缩、消退的表现。见图4。
2.5 接种Colon26小鼠和接种Colon26/IL21小鼠免疫状态情况测定
接种Colon26细胞小鼠较正常小鼠细胞免疫力下降，免疫平衡向Th2型偏移;接种Colon26/IL21细胞小鼠增强了Th1型细胞的免疫功能，使免疫平衡状态转向Th1型，纠正了肿瘤造成的免疫平衡偏移，有效抑制了肿瘤细胞的生长。见表2。表2 接种不同种类细胞小鼠各组间 IFNγ、IL4及IFNγ/IL4 检测比较(略)
3 讨论
近年发现改善肿瘤患者免疫功能可以增强对恶性肿瘤的治疗正常情况下机体处于动态的免疫平衡状态，Th1细胞主要介导细胞免疫，通过分泌细胞因子，调节机体获得性免疫。恶性肿瘤患者的Th细胞亚群发生向Th2的漂移，机体细胞免疫受到抑制，使肿瘤逃避免疫监视。我们用流式细胞计法测定了结肠癌患者外周血Th1、Th2细胞分布情况，发现与正常组相比Th2细胞数目增加、Th1/Th2细胞数目比例下调、免疫平衡向Th2型偏移，机体不能有效杀灭肿瘤细胞，致使肿瘤不断生长，甚至发生远处转移。Onishi等〔1〕研究发现肾细胞癌患者的Th2类细胞及相应因子多高于正常平均值，同时发现Th2类细胞因子含量与肿瘤的恶性程度呈正相关。维持机体的细胞免疫功能不仅依靠Th1型细胞数目，并且其相应细胞因子的活化作用也是重要因素。本文发现与正常人相比大肠癌患者血清中IL4的水平显著升高，IFNγ/IL4比值明显下降，机体免疫功能向降低细胞免疫功能的方向偏移，与流式细胞学方法检测显示的机体免疫失衡结果相一致，结肠癌患者血清中IFNγ降低可以抑制抗原的递呈和NK细胞活化，机体杀灭肿瘤细胞能力进一步下降 〔2〕。所以肿瘤的免疫治疗的重点应以提高、恢复Th1/Th2平衡为主。通过改善和调节细胞因子水平的免疫平衡，加强肿瘤患者的评估和治疗。
IL21与IL2、IL12、IL15、IL18具有同源性，它主要由活化的CD4+ T细胞产生，不仅能促进IFNγ的合成，还能过促进NK细胞增殖、分化以及CTL效应，抑制肿瘤的生长〔3，4〕。为了验证纠正机体免疫平衡对抑制肿瘤细胞生长的作用，我们将小鼠结肠腺癌Colon26细胞和Colon26/IL21细胞接种于小鼠爪垫，观察肿瘤的生长情况〔5〕。在肿瘤的生长过程中，发现Colon26组IL4水平较正常小鼠显著升高，IFNγ水平显著降低，导致接种的结肠肿瘤迅速生长;而Colon26/IL21组在肿瘤生长早期增长速度与Colon26组无明显差异，16 d后生长速度减慢，而后肿瘤逐渐缩小，个别个体甚至出现肿瘤完全消退，同时病理切片可见肿瘤细胞出现核固缩、核溶解，胞浆空泡变性,间质纤维组织增生，肿瘤细胞以凋亡的形式死亡。ELISA测定显示该组小鼠体内IFNγ水平显著升高，IFNγ/IL4也显著升高，免疫平衡转向Th1型。因此我们认为小鼠是通过持续分泌IL21，调节了机体的免疫平衡状态，从而发挥抑制肿瘤作用的。推测IL21调节Th1/Th2平衡的机制可能是IL21通过分布于NK细胞表面受体诱导活化NK细胞终末分化或成熟〔6〕，NK细胞发挥细胞毒活性的同时分泌大量IFNγ，并可促进CD8+T细胞的细胞毒效应〔7〕，有学者发现能表达IL21的小鼠乳腺癌接种于同源基因鼠后，同样可以促进了荷瘤鼠CD8+T细胞肿瘤特异性CTL活性和分泌IFNγ的提高，杀灭肿瘤细胞或诱导细胞凋亡〔8〕。由此可见，IL21通过诱导机体分泌了大量的IFNγ是细胞免疫途径杀伤肿瘤细胞的关键因素。在体外实验中发现，Colon26/IL21肿瘤小鼠脾细胞共培养，脾细胞分泌较对照组更多的IFNγ。IFNγ再作用抗原特异性的T细胞，使其从Th2/Th0转向Th0/Th1型转变，从而纠正Th1/Th2平衡偏移〔9〕。有人认为细胞因子基因导入肿瘤细胞使其自行分泌细胞因子，肿瘤组织局部可聚集高浓度的细胞因子，改变肿瘤局部的免疫微环境，有利于激发免疫应答，这可能亦是其抗肿瘤的
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