迄今为止，还没有发现ADSCs特异的表面标记。在本试验中，CD44、CD45免疫荧光检测结果证明我们所分离培养的细胞为间充质细胞来源并非血液循环中的干细胞。此外，对所分离的细胞进行成骨、成脂诱导，表明其具有多向分化潜能。两种实验结果相结合，可以充分证明我们所分离培养的细胞为间充质来源的干细胞。
用于向成骨细胞诱导的条件培养基成分为10%FBS的DMEM中加入10-7mol/L地塞米松、50 mg/L抗坏血酸、10 mmol/L β甘油磷酸钠，这些化学物质被认为是诱导间充质干细胞向成骨细胞定向分化的诱导基，称为成骨定向培养基(osteogenic medium，OM)。在成骨定向培养基中，各个诱导成分发挥着不同的作用。L抗坏血酸在地塞米松的调控下参与早期Ⅰ型胶原的合成合成，还具有调控碱性磷酸酶活性和蛋白合成的作用;β甘油磷酸钠是提供发生钙沉积所需要的无机磷，从而参与细胞外基质矿化;地塞米松通过增强其受体与基因组中靶序列的亲和性从而调控分化细胞中的基因表达，提高碱性磷酸酶的活性，促进向成骨细胞转化。研究表明，大于10-7mol/L高浓度地塞米松对ADSCs的生长、增殖有明显抑制作用;在其他诱导条件一致的情况下，10-7mol/L地塞米松最有利于ADSCs向成骨细胞分化[9]。最终经上述三者的联合干预，成骨过程基本完成。
ADSCs在OM中诱导后能分化为成骨细胞，细胞由梭形的类成纤维细胞形态转变成为立方形、多角形，体积增大，并表达与成骨表型相关的基因和蛋白，包括碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、骨桥蛋白、骨连接素、降钙素、骨唾液酸蛋白等，并可沉积矿化的细胞外基质[6]。在本实验中，ADSCs在成骨诱导液作用下，培养2周时碱性磷酸酶高效表达，表明成骨过程进入成骨过程的基质成熟期;诱导3周时Von Kossa染色检测到钙盐沉积，4周时钙盐沉积比3周明显增多，表明进入到了成骨过程的细胞外基质矿化期。通过对诱导过程中碱性磷酸酶浓度和钙离子浓度变化进行分析发现，细胞碱性磷酸酶在1周时有少量表达，2周时达高峰，此后逐步下降;而钙离子浓度则呈现出递增趋势，于4周时达到峰值。此研究结果与国内郝伟的实验研究相似[10]。由此证明实现了脂肪干细胞的成骨诱导分化。
综上所述，脂肪干细胞易分离培养、增殖快和良好的成骨诱导活性完全符合对种子细胞的要求，因此，ADSCs在组织工程研究中将有较好的前途，是一种理想的骨组织工程种子细胞。
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