SDF 1 CXCR4促进骨髓基质细胞迁移的作用

　　2.2 SDF-1诱导细胞迁移的结果

　　当下室无SDF-1，BMSCs细胞迁移细胞数为8±3.41，当下室加入SDF-1趋化因子，BMSCs细胞迁移细胞数明显增加，表明SDF-1能够显著增加诱导迁移细胞，SDF-1浓度分别为50、100、150、200、250、300 ng/mL时迁移细胞数为(10.45±4.51)，(15.66±3.25)，(20.51±5.34)，(21.23±5.38)，(21.07±5.17)，(22.01±4.88);加入SDF-1组与未加SDF-1组相比有显著差异(P<0.01)。在0～150 ng/mL浓度内SDF-1诱导BMSCs呈浓度依赖关系，达到最佳迁移效果的SDF-1浓度为150 ng/mL，再增大SDF-1浓度后，迁移的BMSCs增加数目不明显，无统计学差异(P>0.05)见表1。上、下室同时加入SDF-1，迁移细胞数与无SDF-1组无明显差别(P>0.05)。表1 SDF-1浓度对细胞迁移细胞数影响SDF-1浓度

　　2.3 CXCR4阻断型抗体对BMSCs细胞迁移的影响结果

　　CXCR4阻断型抗体对BMSCs细胞迁移的影响结果，经过CXCR4抗体孵育后，迁移细胞数与未加SDF-1组无明显差别(P>0.05)见表2，迁移效应被抵消，进一步表明SDF-1对BMSCs的迁移影响。表2 加入CXCR4阻断型抗体后BMSCs细胞迁移数量SDF-1浓度

　　3 讨 论

　　3.1 趋化因子受体CXCR4在骨髓基质细胞表达特点

　　趋化因子受体CXCR4是G蛋白偶联的7次跨膜蛋白受体。通过和其配体基质细胞衍生因子-1 (Stromal cell derived factor 1，SDF-1)的相互作用在炎性细胞的浸润和淋巴细胞移行、归巢中发挥着重要作用。虽然CD34+细胞跨过内皮屏障的迁移受更多趋化因子的调节，但主要的是SDF-1[1,2]。有研究证实，MSCs可表达CXCR4，但也有人认为MSCs不表达CXCR4。通过流式细胞术检测显示活化的CXCR4，发现CXCR4仅表达于小部分MSC亚型的表面[3]。本研究可看到，在原代培养过程的MSCs就表达CXCR4的受体，此时MSCs分泌的SDF-1对于MSCs起作用，并可以使MSCs进行定向迁移。但为什么MSCs表达CXCR4水平存在争议，可能和MSCs所处细胞周期有关，快速增殖的MSCs细胞呈现高表达CXCR4。

　　3.2 SDF-1在骨髓干细胞的细胞迁移中起重要作用

　　SDF-1是造血干/祖细胞动员和归巢的关键因子，有研究提示，SDF-1通过调节VLA-4表达介导CD34+的细胞的粘附，在CD34+细胞归巢至骨髓中发挥关键作用，并由此影响其在骨髓中的增殖和分化，使干细胞具有迁移归巢的特性。有研究提示在心梗时期有促使干细胞迁移到心梗部分以及周围组织，可能与部分趋化因子有关，譬如：Stem Cell Factor(SCF)，CXCR4 and Stromal Cell–Derived Factor-1(SDF-1)，Granulocyte Colony-Stimulating Factor(G-CSF)，Vascular Endothelial Growth Factor(VEGF)，而具体机制仍不清楚[4]。大量的研究不断证实SDF-1在骨髓干细胞的细胞迁移中起重要作用，并且发现来源于骨髓、脐血动员的外周血中的CD34+造血干/祖细胞表面表达其相应受体CXCR4，而SDF-1能特异性地对CXCR4产生趋化作用，在体外实验中通过对MSCs转染CXCR4基因，增加MSCs表面cxcR4的表达，大大增加了SDF-1对MSCs的趋化作用，进而证实了SDF-1通过受体CXCR4对MSC产生趋化作用。

　　3.3 SDF-1浓度梯度作用及机制

　　本实验中可以看到SDF-1浓度梯度在MSCs的迁移中发挥着重要作用，而当CXCR4被阻断后，这种定向迁移也就被阻断。除了运用CXCR4及SDF-1抗体，运用各种途径提高骨髓SDF-1的浓度也可以达到促进移植细胞归巢到骨髓的目的。降低骨髓内SDF-1的浓度或提高骨髓外SDF-1的浓度，所产生的骨髓内、外SDF-1浓度梯度都可以促进骨髓干细胞的动员。

　　目前对SDF-1对MSCs的趋化作用活体实验也有相关报道，并且发现SDF-1对骨髓基质细胞的趋化作用还需要组织器官存在损伤区域。发现

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