BMP2抗体稀释均为1∶100，与辣根过氧化物酶(HRP) 标记的羊抗兔二抗(1∶500)室温孵育2h后，用DAB显色。以PBS代替一抗作阴性对照。棕色颗粒代表PPARγ和BMP2的阳性表达。应用Leica公司的Qwin软件分析免疫组化的结果。每只动物随机选取3张切片进行免疫组化染色，每张切片随机选取10个(×200)视野，分析灰度值，取其均值代表本张切片的灰度值，3张切片灰度值的均值为该动物免疫组化染色的灰度值。染色的深浅度与灰度值成反比，即组织细胞中PPARγ和BMP2的表达越强，染色越深，灰度值就越低。
1.4 统计学处理 使用SPSS10.0版统计软件，采用t检验的方法进行组间数据的比较，P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 病理组织学观察 正常对照组：骨小梁完整，排列规则，骨小梁中的骨细胞清晰可见，空骨陷窝少见，骨髓中造血细胞丰富，脂肪细胞相对较少，形态正常;模型组：骨小梁稀疏变细，结构紊乱，有碎片出现，骨小梁骨细胞陷窝空疏，骨细胞核固缩，骨髓腔内造血组织明显减少，细胞数目及网状结构较正常稀疏，脂肪细胞体积增大，有的融合成泡状(图1)。股骨头软骨下区空骨陷窝率及骨髓腔内脂肪细胞直径的变化见表1。
表1 两组造模后2、4、8周末空骨陷窝率及髓腔脂肪细胞直径的比较(略)
Tabel 1 Comparison of empty bone lacuna rate and diameter of fat cell between model and control groups at the 2nd, 4th, and 8th week
*P<0.05 vs. control group; **P<0.05 vs. week 2
图1 正常对照组和模型组的HE染色结果(略)
Fig.1 HE staining observation of control and model groups (×400)
A: control group, few empty osteocyte lacunae and many hematopoietic cells were seen; B: model group, a lot of empty osteocyte lacunae, decreasing hematopoietic cells and hypertrophy fat cells were seen
2.2 X线检查结果 正常对照组股骨头形态完整，关节面清晰，股骨头骨密度均匀(图2A);模型组股骨头关节面模糊，骨质结构不清楚，股骨头骨质密度不均匀(图2B)。
图2 正常对照组和模型组于造模后4周双侧X线表现(略)
Fig.2 After injecting steroid 4 weeks, the Xray photograph of control and model group
A: control group: intact articular surface with uniformity sclerotic structure of femoral head; B: model group: blurry intact articular surface with unclear sclerotic structure of bilateral femoral heads
2.3 PPARγ及BMP2的表达 正常对照组股骨头髓腔内骨髓基质干细胞中PPARγ和BMP2呈弱阳性表达(图3A、B);模型组BMP2表达于造模后2周较对照组减弱(图3C)，4、8周呈阴性表达;模型组PPARγ表达于造模后2周呈阳性、4、8周均呈强阳性表达，与同时期对照组比较均有显著性差异(图3D、E、F)。
图3 不同时间点股骨头髓腔内骨髓基质干细胞中PPARγ和BMP2表达(略)
Fig.3 The dynamic expressions of the PPARγ and BMP2 inside the femoral head
A: normal bone marrow PPARγ weakly positive expression; B: normal bone marrow BMP2 weakly positive expression; C: after 2 we
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