腰椎间盘突出症的血清蛋白质组学研究

　　3 讨 论

　　因为蛋白质组的可重复性、准确性及高通量等特点，被广泛应用于对于肿瘤[4]、炎症、免疫等领域。尽管蛋白质组有效应用于各种实验研究，但是用于腰椎间盘突出症的研究只是开始阶段。应用蛋白质组技术分离出与腰椎间盘突出症发病机制可能相关的生物标志蛋白。在10名患者与正常人血清中，发现6种差异蛋白表达。而且，在实验中与对照组中6种蛋白中的4种在血清学水平有差异且有统计学意义。

　　载脂蛋白L(apolipoprotein-L， ApoL)是一种383位氨基酸残基蛋白，与目前已知的其他结构无明显的同源性，只有在胰腺发现该蛋白。在血浆中没有检测出有游离的ApoL，而主要与载脂蛋白A1复合体脂蛋白结合。1999年CG12_1的克隆揭示了ApoL蛋白可能存在，它特征地表达于动脉粥样硬化患者的髂动脉和腹主动脉的内皮细胞，且对肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-alpha，TNF-α)水平变化敏感[5]。一些学者对ApoL特异家族成员进行进一步鉴定以及分类，结果发现他们的相似性提示该家族的出现可能因为通过局部基因多重化而引起的。尽管该蛋白不具有经典信号肽片断，证据表明APOL-1最少已分泌于血浆之中。已知，TNF-α在腰椎间盘突出引起的炎症反应起重要作用[6]。尽管如此，Brisby等[7]研究发现LDH患者与正常人血清TNF-α浓度无明显差异。因此，载脂蛋白L1水平可反映血清TNF-α水平从而可间接地反映腰椎间盘突出严重程度。此外，载脂蛋白L1与溶酶体的溶解有关，且ApoL翻译信号肽段的出现代表一种新的自然免疫复合物的出现[8]。而最近研究表明，ApoL1是唯一一种与bcl-2(B-cell leukemia-lymphoma，B细胞淋巴瘤/白血病-2，一种原癌基因)同源域3结合的脂质类蛋白且能诱导自体吞噬的细胞凋亡途径[9]，而腰椎间盘突出与人类自身免疫有关且bcl-2家族调控的细胞自体凋亡途径参与髓核细胞凋亡过程[10]，因此，有理由相信APO-L1可能为LDH的信号肽段。

　　四连接素(Tetranectin， TN)是一种血纤维蛋白溶酶原结合蛋白，可出现在血浆及细胞外基质(extracellular matrix， ECM)[11]。TN除了它的血纤维蛋白溶酶原结合蛋白特性外，还能与肝磷脂、载脂蛋白(a)，组织纤维蛋白溶酶原激活剂，肝细胞生长因子及血管他丁[12]。TN的表达可在各种内分泌组织、内皮细胞、及间质细胞检测到，其中间质细胞包括成纤维细胞、单核细胞和中性粒细胞。TN也是ECM成骨作用、肌肉发育及再生的决定性组成部分，这些均提示其在修复重建的生理学作用。血清TN水平的下降可见于创伤后或急性心肌梗塞后，类风湿性关节炎及恶性肿瘤等[13]。虽然TN的确切生物学功能未被证实，一些实验证据表明TN在组织的修复重建中起重要的作用。TN可以增加组织型纤维蛋白溶酶原激活剂催化激活纤维蛋白溶酶原以多聚赖氨酸的催化激活作用[12]。因为活化的纤维蛋白溶酶原被公认在细胞外基质的退变中起重要作用。在本研究中，血清TN水平是降低的，因为绝大部分腰椎间盘突出症患者是由于椎间盘退变引起的，而且是以髓核细胞凋亡首先凋亡的一个过程，然后紧随着腰椎间盘重建修复的失平衡状态。这样，LDH患者血清TN水平的降低有理由相信可能与腰椎间盘的修复重建有关，而引起TN的分泌降低。

　　人类载脂蛋白M(apolipoprotein M， apoM)最初在1999年由Xu和Dahlb?覿ck在乳糜颗粒中分离出来[14]。Xu等[15]报道TGF-β 可下调apoM在HepG2的表达和分泌。这提示apoM可能与宿主的防御反应有关，因为apoM基因位于6号染色体组织相容性复合体Ⅲ区域[14]，大多数在该区域的基因均与免疫反应有关，apoM基因位点与TNF-α和淋巴细胞毒素基因位点非常接近[14]。因此apoM可能跟免疫系统相关，或者被一些细胞因子和炎性因子调控。而apoM与LDH的具体关系仍然不明确，需进一步研究证实。免疫球蛋白轻链在LDH中的作用不清楚，是否能作为LDH临床标志有待进一步研究。

　　在过去，没有证据直接表明LDH组表达的4种差异蛋白与LDH的发病机制有关。本文首次提出这四种蛋白与LDH的关系，而且是利用蛋白质组学对LDH在分子水平进行分析， 初步说明这4种蛋白可能与LDH发生的免疫机制以及炎症过程相关，但其具体意义及具体作用途径尚需进一步研究以阐明。

　　【参考文献】

　　[1] Igarashi T， Kikuchi S， Shubayev V， et al. Vo

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