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化疗药物体外诱导白血病细胞凋亡的研究 |
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3.其他：毛地黄皂苷为Sigma产品；BFA膜处理剂含0.02 mol/L 的PBS （pH 7.2）45 ml、甲醛10 ml、丙酮45 ml；淋巴细胞分层液（比重：1.077）。
三、方法
1.白血病患儿骨髓单个核细胞悬液制备及培养：取肝素抗凝的骨髓液2～3 ml，用淋巴细胞分层液常规分离单个核细胞，用含20%胎牛血清的RPMI 1640培养液约10 ml调整细胞浓度为3×105/ml，加入用生理盐水配制的临床治疗相关剂量的化疗药物0.1 ml，使其终浓度分别为长春新碱(VCR) 1.0 μg/ml，地塞米松(Dex) 5.0 μg/ml,柔红霉素(DNR) 10 μg/ml,阿糖胞苷(Ara-C) 50 μg/ml；生理盐水对照组(自发凋亡组)加入0.1 ml灭菌生理盐水(NS),在37℃，5%CO2孵箱饱和湿度下培养［3］。
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