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化疗药物体外诱导白血病细胞凋亡的研究 |
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emotherapeutic drugs showed positive correlations with each other. The correlation coefficient of apoptotic rate in VCR group and Dex group was 0.821 (P<0.001), in Ara-C group and Dex group was 0.994 (P<0.001). (3)The apoptotic rate of fresh leukemic cells was (3.2±1.9)%. ALL and HAL cells cultured for 24 hours in vitro would develop spontaneous apoptosis in (18.2±13.5)%. The spontaneous apoptosis rate correlated positively to the apoptosis rates induced by VCR, Dex and Ara-c, the relevant coefficients were 0.878 (P<0.001), 0.893 (P<0.001) and 0.882 (P<0.05), respectively. (4)CD34 was an independent factor influencing apoptotic rates, the apoptotic rate was significantly lower in CD34 positive group (CD34≥30%) than that in CD34 negative group. (5)There was no relationship between the expression of Bcl-2 and the apoptic rate of leukemic cells. Conclusion Inducing apoptosis is an important mechanism of killing leukemic cells by chemotherapeutic drugs.
【Key words】 Apoptosis; Leukemial; Antineoplastic agents
近年来的研究发现白血病的发生和化疗药物导致的白血病细胞死亡，都与细胞凋亡有密切关系。细胞凋亡是基因控制下的细胞主动死亡过程，现已证实几乎所有化疗药物在体内和体外都能通过细胞凋亡机制杀死白血病细胞［1,2］。化疗药物的抗癌效果不仅取决于药物对靶细胞的直接作用，更在于其诱导肿瘤细胞凋亡的能力。我们研究了几种常用化疗药物在临床治疗相关剂量下对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞及急性混合性白血病(HAL)细胞的凋亡诱导作用及其与临床预后因素的关系。
对象及方法
一、对象
1.病例选择：我院1997年10月～1998年3月住院的初治ALL及HAL患儿共24例。男13例，女11例；年龄4个月～13岁，平均年龄6岁7个月。根据FAB标准，24例初治患儿全部为ALL，其中L1型 2例，L2型 18例，L3型 4例。23例初诊时进行免疫分型，其中B系19例，T系4例。依据Catovsky双表型急性白血病积分法判定其中4例为HAL。
2.正常对照：共10例，男5例，女5例；年龄1～10岁，平均年龄6岁7个月。骨髓取自骨科畸形矫形手术中的切除骨。
二、主要试剂
1.单克隆抗体: 标记荧光素藻红蛋白(PE)的APO 2.7及IgG1。纯净的APO 2.7，Bcl-2 (购自Immunotech公司，法国),标记荧光素异硫氰酸荧光素(FITC)的羊抗鼠二抗 (购自Dako公司，丹麦)。
2.DNA琼脂糖凝胶电泳试剂：溶液1含10 mmol/L的Tris-Cl (pH 7.6),10 mmol/L KCl,10 mmol/L 的MgCl2; 溶液2含10 mmol/L Tris-Cl (pH7.6), 10 mmol/L 的KCl,10 mmol/L 的MgCl2, 0.5 mol/L 的NaCl, 0.5%的SDS, 2 mmol/L 乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA); 5×TBE ,TE , 分子标记物：λ DNA/EcoR I+Hind III(北京中山生物技术公司产品)。
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