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结核病与主要组织相容性复合体 类基因的关联性研究 |
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China is significantly associated with MHC-DRB1*1501. The subtypes of genes with decreased frequencies in the 4 groups were not completely the same, which might mean certain protective function.
【Key words】 Tuberculosis Major histocompatibility complex Genes, MHC class Ⅱ Polymerase chain reaction Oligonucleotide probes
结核病在历史上是最严重的传染病，如今它仍然是威胁人类健康的疾病之一。Koch发现结核分枝杆菌后确定了本病的病原体。但有证据表明遗传因素对结核病的发病有一定影响。结核的病理特征主要表现为机体对结核杆菌的迟发性变态反应，而不是结核杆菌对机体的直接损伤［1］。推测这种易感性的差异与免疫反应的个体差异有关。把结核病的免疫特性与易感性的遗传倾向结合起来考虑，可设想结核杆菌使人类感染后发病受某些免疫反应基因的控制。免疫反应基因是主要组织相容性复合体（MHC）。因此我们考虑结核病的发病可能与MHC的某些等位基因有关联。研究中国儿童各型结核病和MHC Ⅱ类基因的关联是本研究的目的。
材料和方法
一、研究对象
结核病患儿均为中国北方各省市（北京、天津、河北、山西、内蒙古、辽宁、吉林等）的汉族儿童。原发性肺结核（PT）20例，粟粒型肺结核（MT）19例，结核性脑膜炎（TM）36例，结核性胸膜炎（TP）28例。正常对照组为同民族本地无关健康成年人共91例，经胸部X线透视无活动性结核灶及钙化灶。
二、标本收集
取静脉血4～5 ml，用5% EDTA 0.5ml抗凝，-20℃冻存以待提取DNA。
三、实验方法
1.用盐析法提取基因组DNA［2］。
2.基因组DNA的扩增：用PCR/SSP法［3］对103例结核患儿和91例正常对照组进行MHC-DRB1、DQA1、DQB1基因分型。
3.MHC-DRB1、DQA1、DQB1等位基因亚型的测定——序列特异性寡核苷酸探针斑点杂交（PCR-SSOP）［4］：探针采用地高辛寡核苷酸3′末端标记。
四、统计学分析
主要计算相对风险（RR）值和校正P值（Pc）。计算采用上海免疫学研究所HLA与疾病相关分析软件完成。将患儿组和对照组中MHC等位基因的分布进行比较发现关联的等位基因。
结 果
4种结核患儿组DRB1*1501阳性率均高于对照组，RR升高，Pc<0.01或0.05。DQA1*0102亦高于对照组，除MT（可能因例数较少）外，RR升高与对照组差异亦具有显著意义。DQB1*0602 RR亦升高，但Pc>0.05。DRB1*1202 RR在MT, TM, PT升高，而在TP下降，不过Pc均>0.05(表1)。DRB1*1502、1602、0901在各型结核患儿中表现为减少，但Pc均>0.05。
表1 MHC-DRB1、DQA1、DQB1等位基因在4种结核患儿和对照组中的阳性率和相对风险
MHC亚型 阳性例数 阳性率(%) RR
对照
(n=91) MT
(n=19) TM
(n=36) PT
(n=20) TP
(n=28) 对照
MT
TM
PT
TP
MT
TM
PT
TP
DRB1*1201 4
0
1
2
3
4.4
0
2.8
10.0
10.7
0.49
0.62
2.42
2.61
DRB1*1202 8 4 9 3 0 8.8 21.1 25.0 15.0 0 2.77 3.46 1.83 0.17
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