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神经生长因子减轻新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 |
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重量无明显差异[4,5],本次实验未设假手术组,仅在病理检查中另设假手术组3只。实验时各组体重分别为(16.0±1.6) g、(16.1±2.0) g、(16.8±2.3) g、(16.9±2.4) g、(16.6±2.0) g(P>0.05)。 二、模型制备 NGF组和对照组使用我们实验室建立的HIE模型制备方法[4]:将7日龄大鼠短暂乙醚麻醉后切开颈部皮肤,结扎左侧颈总动脉,2小时后放入缺氧罐中,吸入8%浓度氧2小时,制成新生大鼠HIE模型。假手术组仅切开7日龄大鼠颈部皮肤,分离颈总动脉,但不结扎,缝合皮肤后也不缺氧,做为正常对照组。 三、实验治疗 NGF(购自北京市天力兰生物医学工程研究所,批号961118)使用前用注射用水稀释成500 U/ml。NGF组缺氧缺血后即刻腹腔注射NGF 100 U(约5 000~7 000 U/kg),以后每天一次,短期组连续2天,长期组连续7天。对照组和假手术组缺氧缺血后即刻腹腔注射等量的生理盐水,注射量及时间与相应的NGF组相同。 四、观察项目 1.短期组大鼠在缺氧缺血后44小时处死,检测双侧脑组织含水量[4]。即称湿脑重量,然后放到80℃烤箱内48小时,再称干脑重量,计算:(湿重-干重)/湿重=脑含水量。 2.长期组和假手术组大鼠在缺氧缺血后28天处死,观察脑大体改变。双侧脑组织分别称重并计算左脑和右脑重量比例,作为脑萎缩的指标。 3.为证实NGF对中枢神经细胞的保护作用,我们选择了两窝长期组大鼠,在左侧脑组织海马丘脑水平做冠状切片,HE染色后摄片,比较前脑皮层厚度。以假手术组皮层厚度为标准,保留90%以上者为无减薄,~50%为轻度减薄,<50%为重度减薄。同时选取前脑相同区域0.2 mm宽度计数全层神经细胞存活数量和神经胶质细胞数量。 统计学处理:采用t、χ2检验和直接概率法。
结 果 一、鼠死亡数 短期NGF组实验过程中死亡1只,对照组死亡2只(P=0.57);长期NGF组死亡2只,对照组死亡6只(P=0.10)。 二、脑含水量 缺氧缺血后44小时检查,两组大鼠的左侧大脑顶颞部均可见到白色的梗死灶。NGF组左脑含水量比对照组左脑略低,差异无显著意义(表1),两组左脑含水量都比右脑明显增高。
表1 两组鼠脑含水量比较(±s,%)
组别 鼠数(只) 左脑 右脑 t值 P值 NGF组 11 89.2±1.5 86.9±0.6 4.556 <0.001 对照组 8 89.9±1.3 86.8±0.9 5.548 <0.001 t值 1.068 0.385 P值 >0.05 >0.05
三、脑大体检查 缺氧缺血后4周检查,两组大鼠的左侧视神经全部萎缩。脑大体改变主要表现为左脑半球缩小,左侧顶颞部脑皮层凹陷或脑室明显扩大,类似囊肿样改变。NGF组类似囊肿样改变4只(25%),对照组5只(62.5%, P>0.05)。假手术组视神经和脑大体观均未见明显改变。 四、脑组织重量 NGF组左脑重量占右脑重量的比例为(86.7±12.1)%,对照组为(67.8±15.4)%(表2),NGF组脑萎缩比对照组减轻58.7%(32.2~13.3)/32.2%)。假手术组左脑重量与右脑重量之比为(100.5±2.6)%。
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