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左旋硝基精氨酸对新生大鼠缺氧缺血性脑病的防治作用 |
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王静敏 刘立新 刘宝凤 郝翼中 陈连元
本研究通过观察一氧化氮合成酶(NOS)抑制剂左旋硝基精氨酸(L-NNA)对新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)脑组织病理学及钙、水含量的影响来探讨其对HIE的防治效果。 对象和方法:1.选7日龄Wistar大鼠18只,雌雄不限,体重(18±4)g,由山西医科大学实验动物中心提供。L-NNA为Sigma公司产品。 2.将18只大鼠分为三组,伪手术组、HIE组及L-NNA治疗组。三组大鼠先麻醉,分离左颈总动脉,后两组结扎并切断,术后2小时置含8%氧气的密闭容器中。2小时后取出自然复苏。给药方法:后两组均于术前30分钟及HIE模型制成后即刻分别腹腔注射生理盐水1 ml/kg、L-NNA 2 mg/kg、各1次。 3.取左侧海马水平小块脑组织,常规切片、染色,每个切片光镜观察6个视野中神经细胞总数、变性及坏死神经细胞数,取其平均值,取左侧脑组织用干湿重法测水含量。烘干脑组织进行湿式灰化,用原子吸收分光光度计(SHIMADIU AA-670/GU-5型)测吸光度值,以标准曲线法求脑钙含量。 4.统计学处理:所有数据均以±s表示,多样本均数的比较用方差分析。 结果:1.脑组织病理学改变:HIE组脑组织可见神经细胞水肿、变性、坏死,细胞间距增加。神经细胞总数低于伪手术组,变性及坏死神经细胞数高于伪手术组。L-NNA治疗组与HIE组相比,脑病理改变明显减轻(表1)。
表1 脑组织神经细胞总数、变性及坏死神经细胞数的比较(±s)
组别 视野数(个) 神经细胞总数 (个/高倍视野) 变性及坏死神经细胞数 (个/高倍视野) 伪手术组 18 197±26 9.4±3.2
HIE组 18 165±26* 23.2±4.5** L-NNA组 18 212±14△▲ 10.3±2.2△▲ F值 3.925 3 32.515 7
注:HIE与伪手术组比较,* P<0.05,**P<0.01;L-NNA与HIE比较, △P<0.01,L-NNA与伪手术组比较,▲P>0.05
2.脑组织钙、水含量变化:HIE组脑组织钙、水含量明显高于伪手术组,L-NNA治疗组脑钙含量明显低于HIE组,水份含量均低于HIE组,-NNA组脑水含量明显高于伪手术组,脑钙含量无统计学差异(表2)。
表2 脑组织钙含量、水含量的改变(±s)
组 别 例数 钙含量 [μg/(g.bdw)] 水含量(%) 伪手术组 6 1.94±0.97 83.98±1.15 HIE组 6 8.71±2.42* 88.72±1.48* L-NNA组 6 3.75±1.43**▲ 86.34±2.06△ F值 22.404 8 18.567 3
注:HIE与为手术组比较,* P<0.01;L-NNA与HIE比较,**P<0.01, △P<0.05,L-NNA与伪手术组比较,▲P>0.05 △P<0.01
讨论:目前认为在缺氧缺血中造成神经细胞损伤的因素有:一氧化氮产生增多、钙超载等。HIE时一氧化氮过量产生,除了它本身对神经细胞的毒性作用、抑制线粒体呼吸、使ATP减少外,主要通过激活鸟苷酸环化酶使环磷酸鸟苷大量产生,介导具有强烈神经毒性的谷氨酸释放,进而激活N-甲基-D-天门冬氨酸受体使钙通道开放,细胞外大量钙离子内流,导致细胞内钙超载,使神经细胞水肿、变性、坏死。而L-NNA是NOS的抑制剂,可以抑制一氧化氮的产生,极易透过血脑屏障,从而对神经细胞起保护作用。 本实验中L-NNA治疗组脑组织病理改变减轻,进一步说明过量生成的一氧化氮参与了HIE脑组织的病理过程,L-NNA通过竞争性抑制NOS,减少了一氧化氮的产生,减轻了钙超载,从而使脑水肿、神经细胞变性、坏死等病理改变得到改善,对HIE脑组织起到保护作用。目前[1] [2] 下一页 上一个医学论文: 660例壮族新生儿红细胞酶缺乏症及地中海贫血筛查结果 下一个医学论文: 多巴酚丁胺负荷超声心动图评价小儿心脏
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