|
人胎儿卵巢组织转化生长因子 |
| |
态良好，能进一步发育，并具有产生雌二醇的能力［3］。本研究采用免疫组织化学（免疫组化）方法检测人胎儿卵巢转化生长因子-α（TGF-α）与表皮生长因子受体（EGFR）的表达情况，探讨体外培养对胎儿卵巢的影响，从而为胎儿卵巢移植提供理论依据。
r材料与方法
一、标本
20份胎儿卵巢组织取自20例1997年11月至1998年6月就诊河南医科大学第二附属医院妇产科因各种原因死亡的女性胎儿，胎龄16～40周。其中11份小于24周，9份大于24周。将取标本时的前10份卵巢组织标本各分为3段，行组织培养，每1份标本的3段分别培养3、6、9 d。
二、方法
1.TGF-α与EGFR的免疫组化染色：所有卵巢组织经中性甲醛溶液固定、脱水、石蜡包埋，连续切片厚4 μm，脱蜡。采用卵白素-生物素-过氧化物酶技术（ABC法）进行免疫组化染色。ABC（鼠、兔）试剂盒由美国Vector公司生产，TGF-α单克隆抗体（对人表皮生长因子无交叉反应）购自武汉博士德生物工程公司，浓度为1∶20。EGFR多克隆抗体购自北京中山生物工程公司，浓度为1∶50。显色剂二氨基联苯胺为美国Sigma公司产品。以磷酸缓冲液代替一抗作为阴性对照。
2. 结果判定：根据切片中胎儿卵巢组织胞浆免疫组化染色的深浅分级，判定TGF-α与EGFR的表达强度。细胞胞浆为极浅棕色的为可疑表达（±），浅棕色为弱阳性表达（＋），棕黄色为中度阳性表达（＋＋），棕褐色为强阳性表达（＋＋＋）。
三、 统计学方法
采用秩和检验与等级相关分析进行统计分析。
结果
一、 TGF-α、EGFR在胎儿卵巢组织中的表达
TGF-α在17份胎儿卵巢卵母细胞有表达，在7份卵泡细胞与13份基质也为阳性表达，且卵母细胞的染色程度均强于卵泡细胞及基质细胞。EGFR在19份胎儿卵母细胞中为阳性表达，而阳性的卵泡细胞极少或几乎没有，部分基质细胞呈阳性表达。EGFR在卵母细胞的染色程度也强于卵泡细胞及基质细胞，见表1。
表1 胎儿卵巢细胞TGF-α和EGFR的表达情况（份数）
类别 总
份数 TGF-α EGFR
± + ++ +++ ± + ++ +++
卵母细胞 20 3 1 7 9 1 4 8 7
卵泡细胞 20 13 5 2 0 19 1 0 0
基质细胞 20 7 9 3 1 13 6 1 0
二、TGF-α和EGFR在不同胎龄卵母细胞中的表达
不同胎龄的卵巢组织TGF-α和EGFR在卵母细胞中的表达均无显著性差异（P＞0.05），且胎龄与TGF-α、EGFR的表达强度均不存在等级相关关系（P>0.05），见表2。
表2 不同胎龄卵巢卵母细胞TGF-α与EGFR的表达（份数）
胎龄
(周) 份数 TGF-α EGFR
± + ++ +++ ± + ++ +++
<24 11 3 1 4 3 1 3 4 3
≥24 9 0 0 3 6 0 1 4 4
合计 20 3 1 7 9 1 4 8 7
三、胎儿卵巢卵母细胞培养前后TGF-α与EGFR的表达
培养9 d后胎儿卵巢卵母细胞TGF-α与EGFR的表达强度均弱于培养前（P<0.05），而不同培养时间之间TGF-α、EGFR的表达强度均无显著性差异（P>0.05）。见表3。
表3 培养前后卵母细胞中TGF-α、EGFR的表达（份数）
上一页 [1] [2]
上一个医学论文： 活化蛋白C抵抗与复发性流产关系的研究
下一个医学论文： 米非司酮对子宫肌瘤及子宫肌层组织雌 孕激素受体的影响
|
|
|
|
|
|
|
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 妇产科论文 >> 正文