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超排卵刺激后血浆及卵泡液一氧化氮水平的测定 |
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孟涛 儿玉英也 田中俊诚
一氧化氮(NO)作为一种细胞信息载体，广泛参与机体的生理调节，但NO在人围排卵期的生理作用，目前资料尚少。本研究对人超排卵刺激后卵泡液及血液中的NO进行测定，探讨NO在排卵中和卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生机理中的作用。
一、资料与方法
1.研究对象：卵泡液及血液取自1996年5月至1997年1月在日本国秋田大学医学部妇产科住院的27例(6例为多囊卵巢综合征，余为其他原因不孕)接受体外受精-胚胎移植的志愿者，年龄28～35岁［平均(32.5±3.3)岁］。其中7例发生OHSS(5例为多囊卵巢综合征)，OHSS的判定标准见参考文献［1］，重度2例、中度4例、轻度1例。
2.方法：(1)超促排卵采用促性腺激素释放激素激动剂/促卵泡激素/hCG长方案或短方案。(2)血标本采集：在hCG(10 000 U)注射日的注射前、采卵日、发生OHSS第1日、第10日、第20日分别采肘静脉血，分离血清待测激素、分离血浆待测NO。(3)卵泡液的采集：在注射hCG 36小时后采卵，计数回收的卵细胞，用于培养。其中每例患者取直径>10 mm的卵泡2～3个，分别穿刺取卵泡液，取出卵细胞，记录卵泡液量后离心，取上清测定。(4)NO、白细胞介素1β(IL-1β)、激素水平的测定：卵泡液及血浆NO采用Misko等［2］的方法；卵泡液IL-1β采用酶联免疫法；雌二醇(E2)及孕酮(P)采用放射免疫法。
3.统计学分析：数据以±s表示，用t检验、直线回归分析及F检验。
二、结果
1.卵泡液NO及激素水平：共测定60个液量>1.5 ml的卵泡(平均每例2.2个)。60个卵泡液NO、IL-1β、E2、P分别为(50.8±7.9)μmol/L、(131.5±60.6)ng/L、(7.8±0.6)μmol/L、(27.9±0.8)nmol/L。成熟与不成熟卵泡间，除卵泡液量、P之间差异有显著性(P<0.01)外，余差异无显著性(P>0.05)。
2.卵泡液NO与IL-1β、血清E2的相关性：卵泡液NO与IL-1β呈正相关(P<0.01)；27例患者共取卵细胞159个(采卵数)用于培养，hCG注射日血清E2为(8.2±0.7)μmol/L、P为(46.4±11.2)nmol/L、卵泡液NO与血清E2及采卵数呈正相关(P<0.05，P<0.01)。
3.OHSS患者卵泡液及血浆NO水平：无OHSS 者20例，共穿刺104个卵泡(实际测定40个)，卵泡液NO为(53.6±2.3)μmol/L；发生OHSS者7例，共穿刺55个卵泡(实际测定20个)，卵泡液NO水平为(101.8±16.6)μmol/L，两者比较差异有极显著性(P<0.01)。血浆NO水平在无OHSS的20例，于hCG注射日为(39.0±5.3)μmol/L、采卵日为(43.7±4.9)μmol/L；发生OHSS的7例，于hCG注射日为(57.9±5.9)μmol/L、采卵日为(69.8±7.4)μmol/L，发病第1日、第10日、第20日为(83.8±5.9)、(70.7±8.1)、(63.9±2.0)μmol/L；发生OHSS者较未发生OHSS者血浆NO水平升高，在hCG注射日及采卵日两者比较，差异均有极显著性(P<0.01)；随OHSS病情好转其血浆NO水平下降，发病第1日最高，发病第10日已降低，发病第20日与发病第1日相比显著下降(P<0.01)。
三、讨论
卵巢在促性腺激素释放激素及促性腺激素作用下，进入卵泡成熟和排卵过程。在此过程中有多种生物活性物质出现于卵泡内，维持卵泡发育并参与排卵［3］。而NO是具有多项生物学活性的因子，与细胞因子相互作用发挥活性［4］。本结果显示，超促排卵后卵泡内有较高水平的NO，并与卵泡内IL-1β呈正相关。推测，卵泡内的NO可能参与维持卵泡的生长发育及排卵。OHSS的发病机理目前尚不清楚，但与多卵泡发育、高hCG持续刺激、卵巢内产生一些生理活性物质有关［5］。本研究表明，OHSS的发生可能与超促排卵刺激[1] [2] 下一页
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