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细胞凋亡调控蛋白bcl |
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型增生、2例为单纯增生过长、1 例呈增生与分泌混合型。对照组为27例同期就诊的不孕症患者，月经周期正常，血激素正常，不孕原因为输卵管不通或男性不育，年龄23～35岁，其中10例于增殖期、17例于分泌期取少许子宫内膜。所有标本经4％多聚甲醛固定，常规脱水、石蜡包埋，切片厚4μm。
二、方法
1．bcl-2 与bax蛋白测定：采用免疫组织化学SP方法。bcl-2 鼠抗人单克隆抗体和bax 兔抗人多克隆抗体为美国Sant Cruz公司产品，稀释度分别为1∶50和1∶150，SP试剂盒为美国Zymed 公司产品， 二氨基联苯胺四盐酸盐为中山生物技术公司产品，用磷酸盐缓冲液代替一抗作阴性对照，细胞核用苏木精复染。
2．结果判定：阳性为细胞内出现棕黄色颗粒，即为有bcl-2 和bax蛋白表达。按染色强度分为4级：不着色为阴性（-），染色为淡黄色为弱阳性（+），黄色为阳性（++），棕黄色为强阳性（+++）。
三、统计学方法
采用Wilcoxon秩和检验。
结果
一、 bcl-2蛋白在PCOS组与对照组子宫内膜中的表达
bcl-2蛋白在PCOS与对照组子宫内膜中均有表达，主要在腺上皮胞浆中表达， 少数见于胞核和核膜，间质中表达弱，淋巴细胞也有表达。对照组中增殖期bcl-2蛋白表达较分泌期高(P<0.01)，PCOS组子宫内膜bcl-2蛋白表达率为100%，表达较对照组的增殖期高(P<0.05)，也比对照组的分泌期高(P <0.01)。见表1，图1至图3。
图1 增殖期子宫内膜bcl-2蛋白在腺上皮表达呈阳性，
细胞胞浆呈黄色染色；间质细胞表达弱阳性，胞浆呈淡黄色。免疫组化SP ×200
图2 分泌期子宫内膜bcl-2蛋白在腺上皮及间质表达呈弱阳性，
细胞胞浆呈淡黄色染色。免疫组化SP ×200
图3 PCOS子宫内膜bcl-2蛋白在腺上皮表达呈强阳性，
细胞胞浆及核膜呈棕黄色染色；间质细胞表达弱阳性，
胞浆呈淡黄色。免疫组化SP ×200
表1 PCOS组与对照组患者子宫内膜
bcl-2与bax蛋白的表达（例数）
组别 总例数 bcl-2蛋白表达强度 bax蛋白表达强度
- + ++ +++ - + ++ +++
对照组
增殖期 10 0 5
3 2 0 4 3 3
分泌期 17 4 13 0 0 0 4 8 5
PCOS组 18 0 3 6 9 0 3 6 9
二、 bax蛋白在PCOS组与对照组子宫内膜中的表达
bax蛋白在子宫内膜的定位类似于bcl-2蛋白，主要在腺上皮的胞浆中表达，但少数见于胞膜，少数间质细胞也有表达。对照组中bax的表达无明显周期性改变，增殖期与分泌期相比，差异无显著性(P > 0.05)；PCOS组子宫内膜也有bax蛋白的表达，与对照组各期相比，差异均无显著性(P > 0.05)。见表1，图4至图6。
图4 增殖期子宫内膜bax蛋白在腺上皮表达呈阳性，
细胞胞浆呈黄色染色；间质细胞表达弱阳性，胞浆呈淡黄色。免疫组化SP ×200
图5 分泌期子宫内膜bax蛋白在腺上皮表达呈阳性，
细胞胞浆呈黄色染色；间质细胞表达弱阳性，胞浆呈淡黄色。免疫组化SP ×200
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