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子宫内膜样腺癌血管增生与p53蛋白表达的关系 |
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and ≥1/2 myoinvasion, IMD was 8.45±5.53, 8.95±4.99 and 11.96±6.39, respectively (P<0.05). (3) In negative, weakly positive and strong positive groups of p53 overexpression, IMD was 5.52±2.11, 11.75±4.18 and 16.00±4.63, respectively (P<0.01). Conclusions Angiogenesis tightly correlated with clinicopathologic factors, such as stage, grade and myoinvasion, is promoted by p53 overexpression in endometrioid adenocarcinoma. It can be concluded that angiogenesis may act as a predictor of prognosis of endometrioid adenocarcinoma.
【Key words】 Blood vessels Endometrial neoplasms Adenocarcinoma Protein p53
血管作为血液灌注的管道，在实体肿瘤的生长及转移中起着极其重要的作用。近年来，肿瘤生长依赖于血管增生的观点已为多数学者接受，而肿瘤血管的增生受到了多种因素的调控。许多研究显示，p53蛋白可以降调节抑制血管增生的凝血酶反应素-1（TSP-1）和升调节促进血管增生的血管内皮生长因子（VEGF），因而成为调控肿瘤血管生长的重要因素。本研究对子宫内膜样腺癌中肿瘤血管增生与p53蛋白表达的关系，以及肿瘤内血管增生程度与肿瘤临床病理特点之间的关系进行了探讨。现报道如下。
资料与方法
一、研究对象
选自1990年至1995年间于华西医科大学附属第二医院手术治疗的子宫内膜样腺癌患者共85例。患者平均年龄55.1岁（33～75岁）。绝经前22例，绝经后63例。按1988年FIGO标准确定病理分期及病理分级，其中I期56例、II期3例（I、II期为早期，病变局限于子宫）、III期25例、IV期1例（III、 IV期为晚期，病变超出子宫范围）；G1 42例、G2 32例、G3 11例；肌层浸润程度为无肌层浸润15例、浅肌层浸润（浸润深度<1/2）43例、深肌层浸润（浸润深度≥1/2）27例。所有病例均不合并其他严重内科疾病，术前均未接受化学治疗（化疗）、放射治疗（放疗）或免疫治疗。
二、方法
1.主要试剂：第一抗体（一抗）为兔抗人VIII因子相关抗原的多克隆抗体IgG（美国ZYMED公司产品）和鼠抗人p53蛋白的单克隆抗体IgG2α（美国Santa Cruz公司产品）；第二抗体（二抗）为生物素标记的羊抗鼠及兔的通用型抗体IgG（美国ZYMED公司产品）；链菌素亲生物蛋白-过氧化物酶（SP）及3，3′-二氨基联苯胺均为美国ZYMED公司产品。
2.标本制备：标本经10%甲醛固定，石蜡包埋，制成4 μm厚切片。
3.方法：采用免疫组织化学SP连接法（免疫组化SP法）。具体步骤：(1)二甲苯脱蜡及梯度乙醇洗涤3次；(2)1%过氧化氢-甲醇溶液浸泡30分钟；(3)在0.01 mol/L柠檬酸（pH为6.0）缓冲液中，用700 W微波炉中档处理15分钟；(4)25%小牛血清，37℃培育30分钟；(5)滴加一抗（1∶100），37℃培育45分钟；(6)滴加二抗（1∶100），37℃培育15分钟；(7)滴加SP（1∶100），37℃培育15分钟；(8)滴加3，3′-二氨基联苯胺稀释液（1∶20），约5分钟，显微镜下控制显色；(9)干燥后复染、脱水、干燥、封片。以上除第4步外，每一步间均用磷酸缓冲液（PBS液）振荡浸洗3次，每次5分钟。以PBS液置换一抗染色作为空白对照。已知阳性切片作为阳性对照。实验中每批切片分别作1张空白对照和1张阳性对照切片。
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