es;Reaction Buffere 4 μl、RibolockTM Ribonnclease inhibitor 1 μl、10 mM dNTP mix 2 μl，37 ℃孵育5 min，置冰上；加 Revert Aid TM M-Mulv Reverse Transcriptse 1 μl，42 ℃60 min；70 ℃10 min。逆转录成cDNA后分装置-20 ℃保存。 1.2.3 RT-PCR反应 利用Premier 5.0软件，设计如下引物并由上海英骏生物工程公司合成。APRIL上游引物：5 -TCCGATGTGACAGAGGTGATG-3 ，APRIL下游引物：5 -AATGGAAGACACCTGCGCTAT-3 ，预计扩增片段长度265 bp；TACI上游引物：5 -GCTGAAGCTGAGTGCAGATCA-3 ，TACI下游引物：5 -CCCTCTTCTTGAGGAAGCAGG-3 ，预计扩增片段长度113 bp；BCMA上游引物：5 -GCATCAAGAGCAAACCGAAGG-3 ，BCMA下游引物：5 -TCTATCTCCGTAGCACTCAAAGC-3 ，预计扩增片段长度142 bp。GAPDH上游引物：5 -TGATGACATCAAGAAGGTGGTGAAG-3 ，GAPDH下游引物：5 -TCCTTGGAGGCCATGTGGGCCAT-3 ，预计扩增片段长度240 bp。APRIL反应条件：95 ℃预变性30 s，然后94 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 35 s，31次循环，然后72 ℃ 7 min，最后至4℃终止；BCMA反应条件：94 ℃预变性3 min，然后94 ℃ 45 s，56 ℃ 45 s，72 ℃ 45 s，35次循环，然后72 ℃ 7 min，最后至4 ℃终止；TACI的反应条件：94 ℃预变性3 min，然后94 ℃ 45 s，56 ℃ 45 s，72 ℃ 45 s，34次循环，然后72 ℃ 7 min，最后至4 ℃终止；GAPDH反应条件：94 ℃预变性3 min，然后94 ℃ 45 s，56 ℃ 45 s，72 ℃ 45s，30次循环，然后72 ℃ 7 min，最后至4 ℃终止保存。琼脂糖凝胶电泳观察结果。
1.3 统计学方法 应用Stata10.0软件进行统计分析。率的比较采用χ2检验或者Fisher确切概率法，P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 APRIL及其受体mRNA在胃癌和癌旁正常组织内的表达 见图1。经核酸蛋白紫外分析仪检测各标本RNA的A260/280在1.80~1.97之间，提示总RNA质量较好。阳性表达者APRIL位于265 bp，BCMA位于142 bp，TACI位于113 bp，GAPDH位于240 bp。
2.2 APRIL及其受体mRNA在胃癌组织与癌旁胃组织比较 RT-PCR检测APRIL及其受体mRNA在胃癌组织中的表达情况见表1。
3 讨 论
人APRIL编码基因定位于染色体17p13.1上，mRNA约2.1 kb，其在正常
组织中表达很弱，仅见于外周血淋巴细胞、单核/巨噬细胞、树突状细胞、结肠、脾、胰腺、前列腺等组织；而在结肠癌细胞株SW480和食管癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌和肝癌组织等消化系肿瘤中均有不同程度表达[2-3]。我们以往研究发现胃癌细胞株AGS、SGC27901高表达APRIL mRNA[4]。BCMA和TACI是APRIL的两个受体，后者通过膜结合型和可溶型两种形式与其受体结合促进肿瘤细胞增殖或者抑制细胞凋亡作用[5]。 APRIL在体内外具有促进多种肿瘤细胞增殖和存活的效应。Hahne等[2]报道低浓度重组APRI
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