0.05). Conclusion: Over-expression of APRIL mRNA in human gastric tissues may play an important role in the carcinogenesis of the intestinal-type gastric carcinoma, detection of APRIL mRNA will be beneficial to diagnosis human gastric cancer. [Key words] Gtastric carcinoma; Proliferation-inducing ligand; B-cell maturation antigen; Transmembrane activator and calcium modulator and cyclophilin ligand interactor protein
胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一,我国恶性肿瘤中胃癌发病率位居第3位[1]。寻找经济、实用、有效的肿瘤分子标志及早识别胃黏膜癌变是目前的研究热点。本研究应用RT-PCR检测胃癌组织中增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)及其受体B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)和穿膜蛋白活化物(Transmembrane activator and calcium modulator and cyclophilin ligand interactor,TACI)mRNA的表达情况,并与癌旁正常胃组织作比较,分析其与胃癌生物学行为的关系,寻找胃癌早期诊断新的肿瘤标志物。
1 材料与方法
1.1 病例资料 30例胃癌和癌旁胃组织标本均为我院2005年5月~2006年10月手术切除的胃癌组织,标本均在手术切除后20 min内置入液氮罐,转入-70 ℃冰箱保存;所有标本切片皆由2名病理医师双盲法核片分类确定病理类型。胃癌患者中男19例,年龄32~80岁,平均65±11.27岁;女11例,年龄37~81岁,平均65±12.46岁。高、中分化12例,低分化18例;肿瘤<5 cm 14例,≥5 cm 16例;未浸润浆膜层11例,浸润浆膜外19例;无淋巴转移8例,有淋巴转移22例。TNM临床病理分期:Ⅰ期6例,Ⅱ期7例,Ⅲ期15例,Ⅳ期2例。癌旁胃组织均取自胃癌行胃切除的近侧断端胃黏膜,所有断端均距癌组织5 cm以上,组织学检查为基本正常胃黏膜。入选病例均未行化、放疗,无长期服用非甾体类抗炎药、皮质激素药物史。
1.2 实验方法
1.2.1 RNA提取 取组织50~100 mg置入1.5 ml Eppendorf管中,加入1 ml TRIZOL,剪碎,室温放置5 min。加入0.2 ml氯仿,振荡15 s,静置2 min。4 ℃离心,12000 g×15 min,取上清。加入0.5 ml异丙醇,将管中液体轻轻混匀,静置10 min。4 ℃离心,12000 g×10 min,弃上清。加入1 ml 75%乙醇,轻轻洗涤沉淀。4 ℃离心,7500 g×5 min,弃上清。晾干,加入20 μl的DEPC水溶解(65 ℃促溶10~15 min),于-20 ℃保存。
1.2.2 逆转录反应合成cDNA 取总RNA 1 μg在PCR仪中进行逆转录反应:总RNA1 μg、oligo(dt)primer1 μg、DEPCH2O补齐至12 μl,70 ℃孵育5 min,置冰上;加5&tim
上一页 [1] [2] [3] [4] [5] 下一页