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子宫肉瘤组织DNA含量和细胞增殖水平的测定及临床意义 |
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材料和方法
一、材料来源
选择1980～1994年间中山医科大学孙逸仙纪念医院和广东省肿瘤医院收治的75例子宫肉瘤患者的子宫蜡块。核实原诊断并对肿瘤细胞分化程度重新进行判断。患者平均年龄48岁。绝经前患者47例，绝经后患者28例。75例患者均行手术治疗，术后35例患者辅以化学治疗（化疗），其中28例患者化疗2年内达6个疗程或以上； 7例患者辅助放射治疗（放疗），其中术前放疗2例，术后放疗5例。
子宫肉瘤的病理类型根据美国妇癌协会标准，分为子宫平滑肌肉瘤45例、子宫内膜间质肉瘤15例、子宫恶性苗勒管混合瘤15例；临床分期根据FIGO标准，分为I期38例、II期14例、III期12例、IV期11例。75例中子宫平滑肌肉瘤45例，其中26例为I期（原发性16例，继发性10例）；病理分化程度为高分化19例、中分化12例、低分化14例。
所有患者均随访，随访时间为3～10年，其中存活32例，死亡43例。
二、方法
采用FCM测定肿瘤组织中的DNA含量及细胞增殖水平［2］。
1.标本制备：选择组织结构典型的蜡块，不同部位切取50 μm的厚片组织3～5片，以二甲苯脱蜡，乙醇和蒸馏水梯度水化，然后用0.5%的盐酸胃蛋白酶消化组织，经过滤、漂洗、低速离心(600 r/min)后，除去细胞碎片，即得到单细胞悬液。用溴化乙锭（EB）一步插入法行细胞核染色。
2.FCM检测：用美国Coulte公司生产的型号为EPICS ELITE的流式细胞仪检测，检测时用EB染色的鸡红细胞悬液标准仪器，使变异系数（CV）稳定在(5±2)%以内，每份样本检测10000个以上细胞，由计算机计算DNA含量及细胞增殖水平。
三、判定标准
1.DNA含量：用DI表示相对DNA含量，以平均道数值（均道值）表示平均DNA含量。计算公式为：
DI在0.9～1.1之间为二倍体，DI<0.9或>1.1则为异倍体。
2．细胞增殖水平：用SPF、PI表示,两者也反映肿瘤细胞的恶性程度［3，5］。计算公式为：
SPF值以20%为界，将子宫肉瘤患者分为SPF>20%、SPF≤20%两组； PI值以22%为界，将子宫肉瘤患者分为PI>22%、PI≤22%两组。
四、统计学方法
计数资料采用χ2检验和Fish精确检验，计量资料采用方差分析及t检验；生存率采用Kaplan-Meier法计算，用Cox比率风险模型进行多因素生存回归分析。
结果
一、子宫肉瘤组织DNA含量及细胞增殖水平的检测
75例子宫肉瘤组织中，二倍体14例，占19%，异倍体61例，占81%。DI平均为1.27±0.20， SPF平均为(18.9±6.3)%，PI平均为(20.6±6.2)%。
二、 DNA倍体、DI及SPF、PI与临床病理特征
1.DNA倍体、DI及SPF、PI与临床分期：I、II、III、IV期子宫肉瘤的异倍体率、DI及SPF、PI值逐渐增高，分别比较，差异均有显著性(P<0.05)。见表1。
表1 子宫肉瘤临床病理特征与DNA含量
和细胞增殖水平的关系
项别 总例数 DNA
异倍体
率(%) DI
(±s) SPF
(%，±s) PI(%，
±s)
I期平滑肌肉瘤
继发性 10 70 1.13
±0.13 15.8
±5.0 18.8
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