含survivin启动子重组的条件复制腺病毒联合顺铂对卵巢癌株HO 8910体外作用的实验研究

　　与PBS组比较：**P<0.01;与CRAd、CDDP组比较：##P<0.01[HJ*2/3〗

　　3 讨 论

　　条件复制腺病毒即肿瘤特异性增殖型腺病毒，多用于肿瘤的基因治疗。该载体利用肿瘤与正常组织及细胞间结构或代谢途径上的差异，使病毒可以特异性靶向性地在肿瘤细胞内复制、增殖，大量表达目的基因并最终裂解肿瘤细胞。以增殖型腺病毒载体作为肿瘤生物治疗的平台，可以充分利用腺病毒体积较小、弥散能力强的特点，病毒的大量增殖可以直接杀死感染的肿瘤细胞，并扩散到邻近肿瘤细胞;腺病毒溶解肿瘤细胞能释放肿瘤抗原，提呈给树突状细胞和T细胞识别，起到“瘤苗”的作用，产生抗肿瘤免疫反应;除了自身的溶肿瘤能力，增殖型腺病毒载体在大量复制增殖的同时还可使所携带的外源基因大量表达，通过多种途径杀灭肿瘤[4 ～6]。与传统的肿瘤基因治疗以及化疗方案不同，以增殖型腺病毒载体携带抗癌基因治疗肿瘤过程中所表达的抗癌活性物质不但不会像化疗药物因药物半衰期而减少，从理论上讲，只要肿瘤细胞存在，抗癌活性物质就会表达，直至杀灭全部的肿瘤细胞。

　　新型的重组条件复制腺病毒包含了一个survivin启动子，survivin是很有前景的启动子，具有在肿瘤细胞中开启、在肝脏等正常组织中关闭的特性。因此，survivin启动子可以是许多肿瘤治疗中的转录靶目标 [7]。我们在前期研究也得出同样的结论[8-9]。在新的重组腺病毒中，同时改造了病毒衣壳，将一个 RGD4C修饰体插入了腺病毒纤维节的HI环，进而显著地提高病毒转导效率[10]。survivin可以提高病毒作用于肿瘤细胞的特异性，RGD4C可以提高病毒转导到肿瘤细胞的效率，因此这一新型的重组条件复制腺病毒是一种理想的溶瘤病毒，具有高效的感染效率、复制效率和溶瘤能力。

　　另一方面，越来越多的联合治疗应用于临床。尽管单独应用病毒也具有明显的治疗作用，即病毒的复制可以导致宿主细胞破坏，一个病毒细胞内复制可获得1000倍的病毒扩增，从而使病毒感染扩散。但是临床前动物实验及临床研究表明，单一溶瘤病毒治疗不能有效地完全根治肿瘤。病毒治疗与常规的治疗方案如放疗或化疗相联合不但可以提高治疗效率，甚至可以获得完全消除肿瘤的效果。这一理论基于病毒与化疗、放疗的作用机制不同，从而使肿瘤细胞没有时间产生治疗耐受。在溶瘤腺病毒与紫杉醇联合治疗异体移植瘤模型的老鼠体内已发现可以产生累加的治疗效果 [11 ]。因此，在不久的将来联合基因治疗和常规治疗可以有效的应用于临床[11～15] 。

　　本研究中，我们应用新型的重组条件复制腺病毒联合CDDP对卵巢癌HO-8910细胞进行体外研究。结果发现，CRAd单一作用对体外HO-8910细胞的抑制作用呈剂量依赖性，即随着病毒滴度的升高，对肿瘤细胞的抑制作用增高。联合治疗对卵巢癌细胞的抑制率明显高于单一治疗及两者之和，具有协同效果。同时发现，10 pfu/cell 的CRAd联合10 mg/L的CDDP对肿瘤细胞的抑制作用可以达到100 pfu/cell CRAd对肿瘤细胞的抑制作用，提示联合治疗可以减低病毒用量，进而减低病毒的副作用。 CRAd联合化疗可以提高治疗效率的机制还不十分清楚，有以下几种假设: 溶瘤病毒和化疗的抗瘤作用机制不同，是相互独立的，因此几乎不会产生交叉耐药性;化疗可以提高病毒的复制效率， Yu等[11] 研究表明化疗能增加肿瘤细胞中溶瘤病毒的含量，提高病毒的转导效率，同时不改变病毒复制动力学;另外，由于很多化疗制剂具有免疫抑制作用，经静脉、动脉或肿瘤内注射后可以允许高剂量的病毒颗粒到达肿瘤细胞，并能保持病毒在肿瘤内持续扩散;CRAd可以提高顺铂的抗癌效率, 恶性肿瘤细胞表达腺病毒蛋白可以增加对DNA损伤药物(如顺铂)的敏感性。另外，病毒复制还可以诱导肿瘤坏死因子的产生，利用肿瘤坏死因子杀伤肿瘤细胞。

　　本研究结果提示，新型的条件复制腺病毒联合化疗对于体外的卵巢癌细胞具有良好的治疗作用, 为化疗联合病毒的临床研究提供了一些实验室依据。

　　【参考文献】

　　[1] Zhu ZB, Makhija SK, Lu B, et al. Incorporating the survivin promoter in an infectivity enhanced CRAd-analysis of oncolysis and anti-tumor effects in vitro and in vivo [J]. Int J Oncol, 2005, 27(1)：237-246.

　　[

上一页  [1] [2] [3] [4] [5] 下一页