慢速冷冻和玻璃化冷冻对人类卵巢组织中卵泡形态的影响

　　玻璃化冷冻的关键是如何使组织细胞较好的形成“玻璃化”状态，尽量避免冰晶形成。目前主要是通过改良冷冻载物加快冷冻降温速度来改善玻璃化冷冻效果。传统的麦管玻璃化冷冻，冷冻降温速度较慢，约1500 ℃/min。而采用尼龙网、铜格等冷冻载物使组织与液氮直接接触，降温速度达15 000 ℃/min。但是本实验中尼龙网玻璃化冷冻和麦管玻璃化冷冻对人类卵巢组织中卵泡形态的影响无明显差异。Isachenko等[8]报道用铜格为冷冻载物玻璃化冷冻和麦管玻璃化冷冻对人类卵巢组织中卵泡形态影响无明显差异，与本实验结果相一致。可能的原因是卵巢组织片结构较致密而且组织表面积与其容量之比相对较小，使得卵巢组织内部冷热交换的速度无明显改善。因此，通过改良冷冻载物使卵巢组织表面与液氮直接接触，可能并不能有效地改善玻璃化冷冻效果。尼龙网玻璃化冷冻中卵巢组织与液氮直接接触，可能会增加卵巢组织受病原体污染的机会。但是尼龙网玻璃化冷冻，装载卵巢组织片快速简便，每个尼龙网袋可以装载较多的卵巢组织片，而麦管玻璃化冷冻操作较复杂，每根麦管仅能装载1至2个卵巢组织片。因此，尼龙网玻璃化冷冻可以在短时间内完成大量卵巢组织片的冷冻保存，具有一定的优越性。

　　总之，本研究结果提示玻璃化冷冻是人类卵巢组织较适宜的冷冻保存方法。尼龙网玻璃化冷冻对玻璃化冷冻效果无明显改善作用，但是操作更简便，较适宜大量卵巢组织的冷冻保存。

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