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酸中毒对胰岛素样生长因子及其结合蛋白的作用 |
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s of IGFBP-2 in UA and CA were lower (0.61 UA vs UB, 0.57 CA vs CNA ) (P<0.05), but plasma IGFBP-1 (2.89 UA vs UB, 3.26 CA vs CAN) (P<0.01). Liver mRNA in UA was higher than that of their controls. Liver IGFBP-1 mRNA was (1.21±0.46) Dens in UA and (0.92±0.16) Dens in UB, liver IGFBP-2 mRNA was (0.52±0.03) Dens in UA and (0.36±0.06) Dens in UB(P<0.05)； Plasma level of IGF-I did not change as compared to their controls. Conclusion (1) CMA per se, whether induced by uremia or by non-uremic disorders, decreased plasma level of IGFBP-2,which was a result of enhanced IGFBP-2 catabolism instead of reduced production by the liver. (2) The reduced IGFBP-2 levels may be associated with growth retardation occuring in patients with CMA.
【Key words】 Uremia Acidosis Insulin-like growth factorⅠ Insulin-like-growth-factors binding proteins
生长障碍是肾小管酸中毒和慢性肾功能不全（CRF）的严重合并症，目前的研究涉及到生长激素系统［1］，对胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBPs）的作用研究报道较少。本研究观察了尿毒症酸中毒和非尿毒症酸中毒时IGF-I和IGFBPs的改变，以进一步了解酸中毒对生长的影响。
材料和方法
一、实验对象
选用法国幼年雌性Spraque-Darley大白鼠，体重约60～70g。共60只，分为5组，每组12只，所有动物食用同样食物。
1.尿毒症合并酸中毒（UA）组：采用大部分肾切除术和30％酪蛋白饮食制备成尿毒症合并酸中毒的动物模型。
2.尿毒症未合并酸中毒（UB）组：仅在UA食物中加入碳酸氢钠（1.7 g/100 g食物）纠正其酸中毒，作为UA的对照组。
3.随意进食（AL）组：采用假性肾切除术和随意30％酪蛋白饮食，仅作为UA和UB的正常对照组。
4.非尿毒症性酸中毒（CA）组：在食用水中加入3％NH4Cl，制备成酸中毒的动物模型。
5.无酸中毒对照(CNA)组：配对给予CA同样食物。
实验中每日测定大白鼠体重和食物摄入量，实验前后测定2次身长（嘴与尾的长度）、血清pH值及碳酸氢盐（HCO-3）。实验20天，取血清冷冻于-20℃，用于测定血清IGF-1和IGFBPs。杀死大白鼠快速取出肝组织速冻于液氮中，用于测定IGFBPs mRNA。
二、实验方法
1.采用放射免疫分析法测定血清IGF-1。
2.采用Western ligand blot分析法测定血清IGFBP-3（分子量38 000～43 000）和IGFBP-4（分子量24 000）［2］。将血清标本经12％SDS聚丙乙烯凝胶电泳分析。然后电转移至醋酸纤维膜上（0.45 μm，由法国Amersham公司提供）。再将其膜置于含有
125 I标记的IGF-1约8～10×105 Cpm的缓冲液中（由
法国Amersham公司提供），4℃培养48小时，洗去未结合的125I-IGF-1，阴干后，置-80℃放射自显影7天。X光片显示出38 000～43 000带为IGFBP-3，24 000为IGFBP-4。
3.进一步采用Immuno blot方法在28 000～32 000区域分离IGFBP-2和IGFBP-1。将Ligand blot的纤维膜用含tween-2上一页 [1] [2] [3] 下一页
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