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胎盘乙型肝炎病毒感染与宫内传播的关系 |
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factor of intrauterine transmission. HBV transplacental transmission route may be placental cell to cell transfer. The intrauterine infection may occur as early as on the 19th week of pregnancy, but the main timing is possibly in the third-trimester of pregnancy.
【Key words】 Hepatitis B Disease transmission, vertical Placenta
乙型肝炎病毒(HBV)可经胎盘传播至胎儿,造成胎儿宫内感染。乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带孕妇的胎儿宫内感染率为5%～15%［1-4］。目前,有关胎盘在HBV宫内传播中的作用报道不多,而且结论不一。本研究试图对HBV宫内传播的危险因素、途径和感染时间等问题作一探讨。报道如下。
材料和方法
一、研究对象
1.孕早期妇女:选择1995年10月至12月,在陕西省妇幼保健院门诊手术室行人工流产术的孕妇，共计287例(孕40～90天),其中24例为HBsAg阳性。
2.孕中期妇女及其胎儿:选择1995年9月至1996年12月,在陕西省妇幼保健院因各种指征行水囊引产术的HBsAg阳性孕妇及其胎儿，各6例(孕19～24周)。
3.足月分娩妇女及其新生儿:选择1995年9月至1997年2月,陕西省妇幼保健院HBsAg阳性的足月分娩孕妇及其新生儿，各101例(孕37～43周)。
二、标本收集及处理
1.外周血血清：不同孕期孕妇于术前或分娩前、后采肘静脉血3～5ml；新生儿于出生后24小时内,于注射乙肝高效价免疫球蛋白和乙肝疫苗前,采股静脉血1ml,分离血清，-20℃保存待检。
2.胎盘和引产胎儿不同器官的处理：(1)孕早期胎盘:负压吸宫人工流产术后,立即挑选较完整的绒毛样胎盘组织,浸入约10倍体积的4%多聚甲醛液中固定；(2)孕中期和足月分娩胎盘:于胎盘娩出后30分钟内，切取大小约1cm×1cm×2cm的胎盘组织,浸入上述固定液中；(3)孕中期引产胎儿不同器官:主要包括肝、肾、脾、卵巢或睾丸，上述组织于胎儿娩出后1小时内，行尸体解剖取出各脏器,然后切取大小约0.5cm×0.3cm×0.3cm的组织块,按上述胎盘处理方法进行固定。
上述组织标本固定1～2周后,取材、包埋、石蜡固定、连续5 μm切片,待检。
三、实验室检测
1.外周血HBV检测: HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc检测，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)。HBV DNA检测采用聚合酶链反应(PCR)法［5］。
2.胎盘和引产胎儿不同组织 HBsAg、HBcAg和HBxAg检测：采用ABC免疫组化染色法,试剂盒购自美国Vecta公司。HBV DNA检测采用原位杂交法,地高辛标记和检测试剂盒购自德国Boehringer Mannheim公司。检测方法见文献［6,7］。
四、HBV宫内感染的结果判定
1.胎盘HBV感染的诊断方法: 胎盘不同类型细胞中HBsAg、HBcAg、HBxAg和HBV DNA任一项指标阳性。
2.新生儿外周血的检测：新生儿在出生后24小时内,注射乙肝高效价免疫球蛋白和乙肝疫苗前,检测其外周血HBsAg和(或)HBV DNA呈阳性者。
3.胎儿组织的检测：引产胎儿肝脏中检出HBV DNA和HBsAg、HBxAg及HBcAg阳性者。
五、统计学方法
相对危险度的比值比（OR）和趋势χ2检验等计算，均在EPI (5.0版)软件上进行。
结果
一、孕早期妇女及其胎盘HBV感染状况
24例HBsAg阳性孕妇孕早期人工流产的绒毛状组织，经免疫组织化学染色和原位杂交检测，发现有1例蜕膜细胞HBsAg、HBxAg和HBcAg呈棕色阳性着染, HBV DNA呈蓝色颗粒状阳性染色。HBsAg和HBxAg主要位于受感染细胞的胞浆中,呈散在分布。HBcAg和HBV DNA位于受感染细胞的胞核中，呈散在分布。其滋养层细胞和绒毛间质细胞均未见阳性染色。而其他23例胎盘的各类组织细胞均呈阴性染色。上一页 [1] [2] [3] 下一页
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