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nm23 |
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he development and the lymph node metastasis of endometrial carcinoma , and may be related to be prognosis of endometrial carcinoma.
【Key words】 Endometrial neoplasms Lymph atic metastasis Prognosis Genes, suppressor, tumor
nm23基因是1988年发现的抑癌基因［1］。进一步研究发现，nm23基因有nm23-H1和nm23-H2两种亚型， 其中nm23-H1基因与癌细胞的转移更为密切［2］。本研究用免疫组织化学方法检测nm23-H1基因在子宫内膜癌组织中的表达，并探讨其与子宫内膜癌临床、病理及预后的关系。现报道如下。
资料与方法
一、研究对象
取1989年1月至1995年12月在本院妇科住院手术治疗的子宫内膜癌患者60例。60例患者均接受全子宫及双侧附件切除术，其中47例患者同时行盆腔淋巴结清扫或淋巴结活检术。所有患者术前均未经放射治疗及化学药物治疗，术后全部经病理证实为子宫内膜癌，其中腺癌50例、腺鳞癌6例， 透明细胞癌3例，浆液性乳头状腺癌1例。根据1988年FIGO分期，Ⅰ期35例， Ⅱ期9例，Ⅲ期12例，Ⅳ期4例。
二、 方法
1. 标本制作：选取上述患者手术蜡块，5μm厚度切片。
2. 免疫组化染色：采用链霉素亲合素-生物素标记法（Labelled Steptavidin-biotin， LSAB）。步骤为：常规二甲苯脱蜡，乙醇梯度水化，3%双氧水孵育20分钟；蒸馏水洗片， 微波炉修复抗原；用兔血清封闭组织内非特异抗原， 室温孵育30分钟， 加入nm23-H1抗体，稀释度1∶150， 4℃ 冰箱过夜；然后分别加入二抗（生物素标记的兔抗鼠血清）和三抗（过氧化物酶标记的链霉素亲合素），稀释度为1∶400；二氨基联苯胺（DAB）显色， 苏木精复染细胞核，常规封片。每步骤之间都用三羟基甲基甲烷（Tris）缓冲液洗涤3次。 用Tris磷酸盐（TBS）缓冲液代替一抗作阴性对照。试剂：nm23-H1单克隆抗体购自美国Santa公司，LSAB试剂盒为日本DAKO公司生产。
3. 免疫组化染色的结果判定： nm23-H1阳性染色位于癌细胞的胞浆内，呈棕黄色颗粒或团块， 弥漫性分布。根据癌细胞胞浆内棕黄色染色有、无和（或）强、弱分为 强阳性（++）：≥50%的癌细胞有染色，且染色较强；弱阳性（+）：<50%的癌细胞有染色，或虽≥50%的癌细胞有染色，但染色较弱；阴性（-）：癌细胞中无染色。
三、 统计学方法
本研究数据经χ2检验。以Kaplan-Meier法计算生存率, 时序检验法（Longrank Test )检验P值。
结果
nm23-H1基因在60例子宫内膜癌中33例呈阳性表达， 阳性表达率为55.0%。
一、 不同高危因素的子宫内膜癌患者nm23-H1基因的表达
1. 年龄：在≤40岁的6例患者中2例nm23-H1基因表达阳性，在>40岁的54例患者中31例nm23-H1基因表达阳性（57.4%），两者比较，差异无显著性（P>0.05）。
2. 绝经情况：未绝经者nm23-H1基因的阳性表达率为30.0%（3/10），绝经者nm23-H1基因的阳性表达率为60.0%（30/50），两者比较，差异无显著性（P>0.05 ）。
3. 内科三联征（肥胖、高血压、糖尿病）：有三联征者nm23-H1基因阳性表达率为57.1%（12/21），无三联征者nm23-H1基因阳性表达率为53.8%（21/39），两者比较，差异无显著性（P>0.05）。
4. 肿瘤家族史：有肿瘤家族史者nm23-H1基因阳性表达率为66.7%（8/12），无肿瘤家族史者nm23-H1基因阳性表达率为52.1%（25/48），两者比较，差异无显著性（P>0.05）。
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