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碘过量对成年大鼠海马胶质原纤维酸性蛋白影响的实验研究 |
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进水30ml，天津市自来水的碘含量为5mg/L，各组动物每日摄碘量估计为： 6.15mg/L(NI)， 61.5mg/L(10HI)，307.5mg/L(50HI)。
1.2 实验指标和实验方法
1.2.1 全脑重量：以上三组动物喂养6个月后，股动脉放血处死动物，称体重后完整取出，冷盐水清洗，滤纸拭干，1/1000分析天平称重，并计算脑组织相对重量。将脑组织浸入中性甲醛溶液中固定。
1.2.2 组织切片与染色：取出固定液中的大脑，在其蚓部正中矢状切开，取右侧（部分左侧）大脑石蜡包埋。距端脑（嗅脑）9mm处开始作冠状连续切片，厚度5mm，每隔5张取一张，每只动物7张，一张贴于涂有蛋白甘油的载玻片，作焦油紫染色，6张贴于涂有多聚赖氨酸的载玻片，作GFAP免疫组化染色，阴性对照以0.01MPBS代替一抗，光镜下观察海马CA3区神经胶质细胞的形态结构。
1.2.3 试剂：PAP法：一抗为兔抗人GFAP抗体（稀释度为1:75，可用于大鼠）；二抗为生物素标记的羊抗兔IgG；PAP复合物为高敏过氧化物酶复合物；DAB显色。以上试剂均由北京中山生物技术有限公司提供。免疫组化染色方法按试剂盒说明操作。
1.2.4 形态计量学分析：参考大鼠大脑断层图谱定位海马CA3区，应用Motic公司生产的内置数码显微镜拍摄油镜下海马CA3区神经胶质细胞图像，每张切片随机选择6个视野，每只大鼠计量6张切片，以Motic公司提供的Motic Images Advanced 3.1版图像处理软件进行形态计量学分析，计算GFAP阳性细胞的体积密度(Vv)，面数密度(NA)和细胞质的平均灰度值。
1.2.5 测血清甲状腺激素含量。
1.3 统计学方法：测量数据以均数±标准差（±s ）表示，采用SPSS10.0统计学软件包进行数据分析，多个均数之间的两两比较采用单因素方差分析，F检验，进一步两两比较采用S-N-K-q检验。
2 结果
2.1 大鼠脑绝对重量和相对重量，见表1。经方差分析发
现，各组大鼠体重、脑相对重量及甲状腺相对重量比较均无明显差异。
表1 大鼠脑绝对、相对重量及甲状腺相对重量（略）
2.2 形态学观察
2.2.1 焦油紫染色光镜观察：NI组海马CA3区神经元周围可见星形胶质细胞的核，圆或椭圆形，染色浅，核仁明显。各高碘组镜下形态与NI组相近。
图1 NI组100×10 （略）
2.2.2 免疫组织化学染色及形态计量学分析结果：经GFAP免疫组织化学染色后，可见星形胶质细胞的全貌，包括胞体及突起。GFAP免疫反应阳性物质分布于星形胶质细胞的胞浆中，胞核均无阳性着色。胞质内反应程度不同，反应较强者呈棕褐色，反映较弱者呈浅棕色。阴性对照不着色。三组大鼠海马CA3区星形胶质细胞阳性显色强弱不同。
图2 10HI组100×10（略）
海马CA3区GFAP阳性细胞的体积密度(Vv)、面数密度(NA)和细胞质的平均灰度值见表2。经方差分析，各碘过量组海马GFAP阳性细胞的Vv， NA和细胞质的平均灰度值与NI组比较均无明显差异（P>0.05）。
图3 50HI组100×10（略）
表2 GFAP阳性神经元体积密度(Vv)、面数密度(NA)和细胞质的平均灰度值（略）
2.3 血清甲状腺激素测定结果，见表3。经方差分析， 10HI、50 HI组血清甲状腺激素低于NI组，差别有显著性意义（P<0.05）。
表3 大鼠血清甲状腺激素(T3T4)含量（略）
注： *P<0.05与NI组比较有差异
3 讨论
碘是甲状腺激素（TH）合成的重要原料，并且影响甲状腺激素合成与分泌的若干中间环节。碘缺乏或碘过量都会引起机体甲状腺激素水平的改变。机体摄入过量的碘时，甲状腺会呈现较强的自我保护和代偿能力，使其自身的含碘量维持在一个相对稳定的水平。甲状腺对高碘摄入的重要自我保护作用之一是减少对碘的摄取，以维持正常的甲状腺功能［3］。本实验各碘过量组大鼠的甲状腺重量无明显改变，而10HI、50HI组大鼠的血清总T3、T4水平低于NI组。房辉等［4］实验结果也表明，高碘Wistar大鼠在24周时甲状腺重量无明显增大，仍没有形成胶质性甲肿，仅表现部分区域滤泡腔变小，上皮细胞增生肥大。上一页 [1] [2] [3] [4] 下一页
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