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肝癌新生血管的形态学异常及其临床意义 |
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作者：黄耿文,杨连粤,鲁伟群,丁 翔,陶一明
【摘要】 目的 研究肝细胞癌（HCC）新生血管的形态学异常。 方法 采用免疫组化SABC法检测56例 HCC组织及其相应癌旁肝组织和6例正常肝组织中CD34和Endoglin的表达，并采用透射电镜观察微血管超微结构的改变。 结果 56例HCC组织中CD34和Endoglin表示的MVD值分别是127.1±5.9和64.6±11.1，而癌旁肝组织的MVD值分别是7.1±1.3和6.1±1.2。HCC组织的MVD值高于相应的癌旁肝组织，差异具有显著意义（P<0.01）。HCC组织中微血管结构松散，通透性明显增加，可见微血管内微癌栓形成。 结论 HCC组织中新生血管生成明显增加，而且这些新生的微血管在结构上是有缺陷的，这为癌细胞的转移提供了门户。
【关键词】 肝细胞癌；新生血管生成；转移
新生血管生成是肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）术后复发转移的重要机制之一，与HCC的预后密切相关。本文采用免疫组织化学和透射电镜对HCC新生血管的形态学异常进行研究，并探讨其临床意义。
1 材料与方法
1.1 临床资料
本实验所用组织标本取自中南大学湘雅医院2000年3月～2002年3月手术切除的HCC标本，共56例。其中男49例，女7例，年龄19～77岁，平均年龄46.5岁。全部病例乙肝表面抗原均为阳性，且术前均未接受其他治疗。癌旁组织为距上述56例HCC组织1cm的非癌肝组织，均有不同程度的肝病背景。正常肝组织6例，取自肝血管瘤或肝囊肿周围的正常肝组织。
1.2 免疫组织化学
采用链霉抗生物素生物素过氧化物酶复合体（SABC）法，操作步骤参见说明书。CD34和Endoglin一抗采用相应的小鼠抗人单克隆抗体（NEOMARKERS公司），工作浓度均为2μg/ml。以磷酸盐缓冲生理盐水（PBS）代替一抗作为阴性对照。阳性染色呈棕黄色。微血管密度（MVD）结果判断标准参照Weidner标准。
1.3 透射电镜
组织经2.5%戊二醛固定、包埋、修块、定位。超薄切片机切片（瑞典产LKBⅢ型切片机）、铅铀双重染色，置日产H600透射电镜下观察。
1.4 统计学分析
根据本研究所得结果为计量资料的属性，用成组t检验分析组间差异，P<0.05表示差异具有显著性。
2 结果
2.1 HCC组织中CD34和Endoglin的表达
阴性对照切片均无阳性染色。CD34和Endoglin阳性染色主要位于内皮细胞胞膜，见图1、2。56例HCC中CD34和Endoglin表示的MVD分别是127.1±5.9和64.6±11.1，而癌旁肝组织的MVD值分别是7.1±1.3和6.1±1.2。HCC组织的MVD值高于相应的癌旁肝组织，差异具有显著意义（P<0.01）。
2.2 HCC组织中新生血管的超微形态学观察
与癌旁肝组织相比，HCC组织中的微血管形态失常，呈扩张扭曲状。内皮细胞间的连接松散、扩大，甚至消失。内皮细胞与周细胞间连接松散，基底膜结构疏松，见图3、4。有时可见肿瘤细胞整合于血管壁上，或经微血管的空隙侵入血管管腔形成微小癌栓，见图5。内皮细胞胞浆中的线粒体和内质网水肿，呈空泡样变[1] [2] 下一页
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