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神经损伤引发实验大鼠痛觉及初级感觉神经元的电生理变化 |
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ms，频率：0.1 Hz。找出激发神经元动作电位（action potential, AP）的阈强度 (rheobase), 阈强度指诱发AP所需的最小胞内刺激电流强度。二，给坐骨神经以不同强度的电压刺激, 经轴突激发神经元产生动作电位。电压幅度1 V~50 V，波宽：0.01 ms，频率：0.1 Hz。记录信号经3 kHz高频滤波, 可储存于计算机中, 用于实验后的统计与分析。实验结束后对所记录的DRG神经元进行统计分析, 根据动作电位波型, AP峰的持续时间(APD,duration of AP, ms) 和传导速度（conduction velocity，CV，m/s）将DRG神经元分为Aβ、Aδ 和 C三类。 本文对于静息膜电位 (rest membrane potential, Vm) －45 mV以下, 动作电位幅度>60 mV Aβ和Aδ类神经元留用，而 C类小神经元静息膜电位在－40 mV以下,动作电位幅度>50 mV时留用。对留用的神经元进行以下几方面的分析和测量：测量神经元的静息膜电位；观察神经元静息膜电位时有无自发放电；对动作电位的几个参数进行测定，包括: a，APD：AP峰高的中点部位之间的时间距离, 又称半峰宽； b，AP峰的幅度（AP amplitude，mV）：指AP峰顶和基线（即VR水平）之间的电位差；c，超极化后电位（AHP）幅度（AHP amplitude： AHPA，mV）指AHP谷底和基线（即VR水平）之间的电位差； d, AHP的持续时间（AHP duration：AHPD，ms）: AHP峰高的中点部位之间的时程, 又称AHP的半峰宽。
1.4 实验数据的处理和统计学分析 资料的处理和统计分析用BL420生物信号处理软件, Microsoft Excel, SPSS统计软件。所有实验数据以means±SD来表示，n指所测定的神经元的数目。用Student’s 双尾ttest检验进行统计分析。P<0.05被定义为有统计学差异(α介值为0.05)。
2 结果
2.1 CCI大鼠在神经损伤后表现出热痛敏行为 图1示CCI大鼠术后3 d、5 d、7 d、9 d的热痛敏行为测试结果，可见损伤侧缩腿反应潜伏期较对照侧明显缩短，差异具有统计学意义，并且在术后第7天缩腿反应潜伏期最短。大鼠损伤侧肢体间或有快速的激惹性抬腿动作，表明CCI大鼠处于自发性疼痛及热痛敏状态中。
图1 CCI大鼠的热痛觉过敏行为（n=15）（略）
2.2 神经损伤后导致神经元兴奋性增加 电生理实验中,共计从L4或L5 DRG神经节中记录到320个神经元，其中73个神经元来自正常对照组, 247个神经元来自CCI大鼠即实验组。来自CCI大鼠神经元的自发性AP的发生率为35.2％,对照组自发性AP的发生率为12.7％,CCI组明显高于对照组，表明神经损伤后兴奋性增加。对来自两组大鼠中的一些神经元的动作电位参数进行了测试，各项测试结果见表1和表2。表1为正常组动作电位参数的测试结果，表2为CCI实验组动作电位参数的测试结果。比较表1与表2两组神经元的AP参数，发现在CCI组 DRG的三类神经元的静息膜电位值都比正常神经元绝对值减小，可见损伤的DRG神经元静息膜电位移向了去极化方向。CCI组三类神经元引发动作电位所需阈强度均小于对照组，差异具有统计学意义，表明CCI组神经元兴奋性增加。
表1 正常组动作电位参数的测试结果（略）
3 讨论
大鼠坐骨神经损伤后, 损伤侧肢体表现出自发性疼痛及热痛敏行为，对于这种现象的成因有多方面的研究报道。病理研究发现在神经损伤部位神经结构发生了质的上一页 [1] [2] [3] [4] 下一页
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